Bovine viral ishal virus antikoru elisa dəsti

Xüsusiyyət

 

Test prosedurları və şərh

 

Addım 1 Test proseduru

1.1 Yuma Həll Hazırlığı

WOrking konsentrasiyası wKişinin maye:İstifadədən əvvəl yuyulma həlli otaq temperaturuna (20-25 . . təmizləmək üçün bərabər bir şəkildə sarsılmaq üçün (məsələn, 5ml saflaşdırılmış suya görə 5ml, 5ml saflaşdırılan yuyulma həlli əlavə olunur və seyreltilmiş yuyucu maye 7 gün ərzində 2-8 dərəcəsi saxlanıla bilər)

1.2 Nümunə hazırlığı

① Bütün heyvan qanı götürüldü, 10 dəqiqə 4000RPM-də sentrifuged və fövqəladə toplanmış .} serum da təbii olaraq hemoliz olmadan laxtalana bilər .

② Serum nümunəsini 1:50 (3ul serum nümunəsini 147ul nümunə ilə dəyişdirmək) və hərtərəfli qarışdırın .

Qeyd: Mənfi və müsbət nəzarət də seyreltely .

1.3 ferment hazırlığı

Enzme'nin birləşdirilməsini seyreltin 1: 250 (2ul ferment birləşməsi (x100) 498ul nümunə suient ilə əlavə edin) və hərtərəfli qarışın .

1.4 Test proseduru

Ferment etiketi mikroplate (nümunələrin sayına görə, sökülərək və bir neçə dəfə istifadə edilə bilər), hər biri ferment etiketi mikroplate, hər biri iki quyu əlavə edin və hər birinin hər biri üçün hər birini yaxşı və müsbət nəzarət üçün əlavə et 30 dəqiqə . üçün 37 dərəcədə inkubasiya edin

Sızdırmazlıq plaka filmini, boşqab quyusundakı həllini silkələyin, 300 ml işləyən konsentrasiya yuyucu maye əlavə edin və sonra yüksək səviyyədə olan mayeləri 5 dəfə təkrarlayın və nəhayət təmiz emici kağız üzərində qurudun .

③And 100 mkμl ferment hər bir qucaqlayın, boşqabı örtün və 45 dəqiqə ərzində 37 dərəcə inkubasiya edin .

Sızdırmazlıq plaka filmini, boşqab quyusundakı həllini silkələyin, 300 ml işləyən konsentrasiya yuyucu maye əlavə edin və sonra yüksək səviyyədə olan mayeləri 5 dəfə təkrarlayın və nəhayət təmiz emici kağız üzərində qurudun .

⑤ Hər bir quyunun 100μl substrat həlli, boşqabını örtün və 10 dəqiqə ərzində 10 dəqiqə yüngül .

⑥Add 50μl hər bir quyuya həll edin və nəticəni 5 dəqiqə ərzində .

 

Addım 2 Nəticə Təfsiri

 

Hər quyunun OD450 dəyəri 96- yaxşı mikroplate oxuyucusu haqqında oxundu .

2.1 təsdiqləmə

Mənfi nəzarətin orta OD450NM dəyəri idi<0.1 and the average OD450nm value of positive control /the average OD450nm value of negative control was ≥3, the experimental results were valid. Otherwise, the test should be repeated.

2.2 Hesablama metodu

Hər bir nümunə üçün düzəldilmiş nümunə və nəzarət dəyərlərindən istifadə edərək S / P-ni aşağıdakı kimi hesablayın:

2.3 Nəticə təfsiri

Nə vaxt s / p<0.25, it is judged as negative.

0 . 35-dən çox və ya bərabər olduqda və ya bərabər olduqda, müsbət olaraq qiymətləndirilir.

S / p-dən 0,25 az və ya bərabər olduqda<0.35, it is judged as suspicious, and suggest to repeat sampling and test one week later.

 

Seksual Tags: Bovine viral ishal virus antikoru, Çin Bovine viral ishal virus antikoru, istehsalçılar, fabrik